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      上海睿遠生物醫藥科技有限公司
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      什么是多克隆抗體?與單克隆抗體有哪些區別?

      作者:小編 日期:2020-09-14 13:18:07 點擊數:

      1.多克隆抗體與單克隆抗體的基本概念 
      克?。?/span>指無性繁殖細胞系,是由單一的祖先細胞分裂繁殖而形成的一簇細胞純系。在這個家族的所有成員中,如無突變發生,基因是完全相同的。 
      多克隆抗體(polyclonal antibody, pAb):用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物,可刺激機體多個B細胞克隆產生針對多種抗原表位的不同抗體。所獲得的免疫血清實際上是含有多種抗體的混合物。 
      單克隆抗體(monoclonal antibodies, mAb):由一個識別一種抗原表位的B細胞克隆產生的同源抗體。高度均一、特異性強、效價高、少或無交叉反應性。 

      什么是多克隆抗體?與單克隆抗體有哪些區別?(圖1)



      2. 多克隆抗體與單克隆抗體的制備比較 

      多克隆抗體制備的主要流程包括:①制備抗原;②選擇實驗動物;③動物免疫;④試取血進行測試,看看是否成功免疫;⑤如果成功免疫,處死實驗動物,采集全部血清;⑥純化出抗體;⑦鑒定抗體,包括純度以及特異性。

      與單抗制備的區別  經過特定抗原處理過的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞通過細胞融合的方法得到雜交瘤細胞,經HAT培養基篩選、ELISA檢測效價后就得到陽性克隆株,最后進行細胞培養或將細胞注入到動物(一般為balb/c小鼠)腹腔中用腹水培養,收集上清/腹水純化后就能得到單克隆抗體。而制備多克隆抗體就沒有單克隆抗體繁瑣,只需將抗原(純度越高越好)直接注入到動物體內進行免疫,經過3至4次免疫,ELISA測其效價合格后,收集血液離心得到上清,純化后即能得到多克隆抗體。因此多抗制備的周期就比單抗制備的短,首次制備價格也比單抗要低。

      什么是多克隆抗體?與單克隆抗體有哪些區別?(圖2)


      3. 多克隆抗體與單克隆抗體的應用比較 
      (1)多克隆抗體的應用 

      一種良好的多克隆抗血清含有抗某種抗原不同表位的多種抗體。由于多克隆抗血清通常包含抗某一抗原的不同表位的抗體,包括變性—抗性的表位,所以,在深固定的樣本中也會發揮效應,在石蠟包埋組織切片的染色中,多克隆抗體常選用。根據實驗的不同需要,多克隆抗體應用于相應抗原的標記。此外,在農業生產中,多克隆抗體被用于農藥殘留現場監測;在臨床應用中,多克隆抗體主要用于病原物的檢測、疾病的診斷及治療,如作為蛋白類免疫抑制劑用于移植反應和自身免疫病的治療。

      (2)單克隆抗體的應用 

      單克隆抗體可用于分析抗原的細微結構及檢驗抗原抗體未知的結構關系;生產出針對復雜生物混合物中的特定分子的抗體,可用于分離、分析及純化該特定分子抗原;其試劑可用于臨床診斷和治療,或用于以單抗為彈頭的“生物導彈”藥物,直接導向腫瘤等。自Mathe于1958年首次將抗鼠白血病免疫球蛋白與氨甲喋呤(MTX)交聯用于導向治療以來,相繼出現了多種化療藥物與各種抗體的免疫耦合物,藥物與單抗直接交聯、藥物通過小分子交聯劑與單抗連接及藥物通過大分子載體與單抗相連形成免疫耦合物,促進了分子導向藥物的研制工作從實驗室走向臨床并廣泛應用于疾病治療。

      4. 多克隆抗體與單克隆抗體的其他比較 


      單克隆抗體多克隆抗體
      特異性較強較弱
      穩定性相對較差,對理化條件敏感較好
      對免疫原的要求不純的免疫原也能得到高純度的抗體免疫原純度越高越好
      標準化易于標準化,批次間差異小較難,不同批次的抗體質量差異大
      識別僅檢測抗原上的一個表位能識別多個表位
      交叉反應不易與其它蛋白發生交叉反應很常見,難避免非特異反應
      沉淀和凝集反應大多數沒有
      制備成本較高較低
      制備周期較長較短
      價格較高較低




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